¡¡¡¡食品伙伴網(w¨£ng)注£º本方法源自奶牛乳房炎防治技術(sh¨´)指南(試行)£¨農醫發(f¨¡)[20l0]29號£©

¡¡¡¡推薦使用體細胞計數儀進(j¨¬n)行乳汁體細胞計數¡£

¡¡¡¡體細胞計數法有直接計數法和間接計數法¡£直接計數法中簡(ji¨£n)便易行的方法是直接用顯微鏡進(j¨¬n)行體細胞計數£¨SCC£©£¬間接計數法就是后面提到的CMT¡£法¡£

¡¡¡¡l主要試劑和材料

¡¡¡¡美藍染色液£º美藍乙醇飽和溶液30mL.£¨美藍2g£¬95£¥乙醇100mL£©£¬10£¥氫氧化鈉溶液0.1mL£¬蒸餾水100mL£¬將上列溶液混合搖勻£¬過(gu¨°)濾后備用¡£二甲苯¡¢95£¥乙醇¡£生物顯微鏡¡¢載玻片¡¢l0μL¡£微量加樣器£¨或移液?#23560;(zhu¨¡n)©µ取?/p>

¡¡¡¡2操作方法

¡¡¡¡2.1?#31185;?#21046;備

¡¡¡¡涂布£º充分搖勻新鮮乳樣£¬用l0μL微量加樣器吸取中部乳汁l0μL£¬或用接種環(hu¨¢n)蘸取等量的乳汁£¬將乳樣滴于玻片一端中側£¬仔細涂布成約lcm2¡£面積的乳膜£¨為便于操作£¬可在玻片下墊襯一張?#24067;?#26495;£¬紙板上用毛筆劃數個(g¨¨)面積為lcm2的方格透視£©¡£

¡¡¡¡干燥¡¢脫脂¡¢固定?#21644;?#22909;乳膜的玻片于37¡æ溫箱中干燥£¬然后用二甲苯脫脂5min£¬再置95£¥乙醇中固定5¡«10min¡£

¡¡¡¡染色£º玻片干燥后£¬用美藍染色液染色5min¡£水洗£¬再用95£¥乙醇脫色數分鐘£¬水洗干燥后鏡檢¡£

¡¡¡¡鏡檢及計數£º在生物顯微鏡油鏡下觀(gu¨¡n)察£¨最好用l0×目鏡£¬其視野直徑要求為0.016£©£¬計數100個(g¨¨)視野內的細胞數£¬然后用下式計算£ºSCC=100xN£¯§­r2

¡¡¡¡視野面積§­r2=3.1416×£¨0.016£¯2£©2¡£=0.0002cm2£¬

¡¡¡¡顯微鏡系數N=I£¯0.0002×100=500,000

¡¡¡¡SCC=系數×每個(g¨¨)視野的細胞平均數£¨即細胞總數÷100£©£º細胞數£¯mL乳¡£

¡¡¡¡3判定標準

¡¡¡¡隨著(zh¨´)國際和國內乳品行業(y¨¨)的接軌£¬國內標準也在提高£¬一般以每毫升牛奶中含20萬(w¨¤n)個(g¨¨)細胞為亞臨床乳房炎的臨界值£¨+£©£»超過(gu¨°)該值為陽(y¨¢ng)性£¬低于該值則正常¡£